2015年大四的祝天宇在几百个竞争者中脱颖而出被选为大道喜剧院首排首演话剧《闹洞房》后更名为《婚姻保卫战》女一号佟佳瑶；随后又演出了国家话剧院话剧《守望》青蓝剧场话剧《开心晚宴》话剧《父亲》等。由此开始演戏生涯。2016年与鹿晗拍摄kfc肯德基故事片广告。同年参演古装悬疑剧《热血长安》。2017年与成龙,钟楚曦,阮经天合作拍摄贺岁档电影《神探蒲松龄》。2018年祝天宇与陈妍希,何润东,张晨光合作在电视剧《邓丽君之我只在乎你》饰演明事理,知进退的汪家千金汪仲芬。2019年拍摄青春校园轻喜剧《放学别走》在剧中饰演优秀学霸师姐晏紫宁。2020年3月与胡一天,张云龙合作的网剧《民国奇探》在爱奇艺播出。2021年受大道喜剧院邀请全国巡演话剧《托儿》饰演女一号为人单纯,爱财又可爱的婚托小凤。同年拍摄了精品推理剧《民国大侦探》饰演隐忍克制的温婉女校教师李姵。2022年8月,与王志文,余皑磊,任素汐等前辈合作拍摄迈加导演执导的轻喜剧《消失的大象》。随后与任达华,安志杰拍摄电影《老家伙》。同年参与拍摄的真人真事英模系列电影《非凡守护》11月在爱奇艺播出。2023年4月6日,祝天宇与陈晓,陈建斌合作拍摄刘海波导演执导的刑侦悬疑剧《尘封十三载》播出,饰演警察小秦。